光度計(jì)是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度,對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的測(cè)量?jī)x。它主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理器和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。目前,它已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長(zhǎng)濃度的定量。
光度計(jì)的基本工作原理是基于物質(zhì)對(duì)光百度(對(duì)光的波長(zhǎng))的吸收具有選擇性,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶,所以,當(dāng)光色散后的光譜通過(guò)某一溶液時(shí),其中某些波長(zhǎng)的光線就會(huì)被溶液吸收。在一定的波長(zhǎng)下,溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系,即符合比爾定律。T=I/Io lg(Io/I)=εcb 式中,T為透過(guò)率,Io為入射光強(qiáng)度,I為透射光強(qiáng)度,A為消光值(吸光度),ε為吸收系數(shù),b為溶液的光徑長(zhǎng)度,c為溶液的濃度。從以上公式可以看出,當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液厚度一定時(shí),透光率是根據(jù)溶液的濃度而變化的。
光度計(jì)的特點(diǎn):
1、采用高性能較好的光柵,波長(zhǎng)精度更高;
2、采用進(jìn)口鎢燈,發(fā)光效率高,使用壽命長(zhǎng),功耗降低;
3、超大規(guī)模集成,T/A轉(zhuǎn)換精度高,穩(wěn)定性高;
4、微機(jī)系統(tǒng)的應(yīng)用,使操作使用簡(jiǎn)單可靠。
光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源,通過(guò)系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源,光源透過(guò)測(cè)試的樣品后,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。