紫外可見光分光光度計(UV-Vis)是一種廣泛用于分析溶液中物質(zhì)濃度、反應(yīng)速率及光學(xué)性質(zhì)的儀器。微量紫外可見光分光光度計是針對樣品量較小的測定需求設(shè)計的設(shè)備，通常用于生物學(xué)、化學(xué)和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。本文將介紹如何簡單、準(zhǔn)確地操作微量紫外可見光分光光度計，確保獲得可靠的實驗結(jié)果。
 

　　1.準(zhǔn)備樣品與試劑
 

　　在開始使用分光光度計之前，首先要確保樣品和試劑準(zhǔn)備好。微量分光光度計要求樣品量較少，一般只需要幾十微升到幾百微升的樣品量。常用的樣品容器為微量比色皿，確保選擇適合儀器的比色皿材質(zhì)(如玻璃或石英)，并清洗干凈。對于某些實驗，可能需要配置標(biāo)準(zhǔn)溶液或校準(zhǔn)曲線，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 

　　2.打開分光光度計并進(jìn)行預(yù)熱
 

　　開啟微量紫外可見光分光光度計時，首先檢查儀器的電源連接是否正常，然后啟動儀器。大多數(shù)儀器都需要在啟動后進(jìn)行預(yù)熱，預(yù)熱時間一般為10-20分鐘。在此期間，儀器會穩(wěn)定光源和溫度，以確保測量結(jié)果的穩(wěn)定性。預(yù)熱過程中，不要進(jìn)行任何操作，等待儀器屏幕顯示正常工作狀態(tài)。
 

　　3.選擇波長并進(jìn)行零點校準(zhǔn)
 

　　根據(jù)實驗需求選擇測量波長。紫外可見光分光光度計通常提供寬廣的波長范圍，從200 nm到1100 nm不等。在儀器的顯示界面選擇目標(biāo)波長，通常選擇較大吸收峰所在的波長，以便進(jìn)行吸光度測量。為了消除樣品和容器的干擾，在測量之前需要進(jìn)行零點校準(zhǔn)。將空白溶液(不含待測物質(zhì)的溶劑)置于比色皿中，放入儀器中并按下“零點校準(zhǔn)”按鈕。完成后，儀器屏幕會顯示零點值，確保儀器的基線正常。
 

　　4.加入樣品并放入儀器
 

　　將準(zhǔn)備好的樣品溶液吸取到微量比色皿中，注意不要讓樣品液體接觸到比色皿外壁。用光譜計提供的專用紙巾輕輕擦拭比色皿外壁，確保清潔無污點。然后，將比色皿小心地放入分光光度計的樣品室，確保比色皿位置正確，光束可以穿透樣品。如果儀器帶有自動進(jìn)樣功能，直接將樣品瓶或比色皿放入進(jìn)樣口。
 

　　5.測量吸光度并記錄數(shù)據(jù)
 

　　當(dāng)樣品已經(jīng)放入儀器并校準(zhǔn)完成后，按下“測量”按鈕，儀器會自動開始采集樣品的吸光度數(shù)據(jù)。在儀器屏幕上會顯示相應(yīng)的吸光度值，記錄下該數(shù)據(jù)。如果進(jìn)行定量分析，可以通過比對標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，使用比爾定律(Beer’s Law)計算樣品濃度。某些儀器還可以自動生成圖譜，顯示吸光度與波長的關(guān)系曲線。
 

　　6.清洗并關(guān)閉儀器
 

　　測量結(jié)束后，立即取出比色皿，用清潔劑清洗干凈。對于微量分光光度計來說，清潔工作尤為重要，因為殘留的樣品可能會影響下次實驗的結(jié)果。用去離子水沖洗比色皿，并用紙巾擦干。之后，將比色皿妥善放置在專用存放位置。較后，關(guān)閉儀器電源，清理實驗臺面，確保儀器處于待機狀態(tài)。
 

　　微量紫外可見光分光光度計的操作相對簡單，但每個步驟都需要小心謹(jǐn)慎，確保儀器的準(zhǔn)確性和樣品的可靠性。從準(zhǔn)備樣品、校準(zhǔn)儀器到測量吸光度，再到清潔和關(guān)閉儀器，每一步都至關(guān)重要。通過這些簡單而關(guān)鍵的操作步驟，您能夠獲得高質(zhì)量的實驗數(shù)據(jù)，為科學(xué)研究和質(zhì)量控制提供有力支持。